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430685
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介紹和解釋實(shí)驗室儀器的工作原理、操作步驟、維護保養、技術(shù)規范、應用案例等內容
研究摘要
副溶血弧菌是導致食用海鮮后胃腸炎爆發(fā)的主要致病菌之一。環(huán)二鳥(niǎo)苷酸(c-di-GMP)是廣泛存在于細菌中的第二信使，可控制多種細菌行為，包括致病機制、生物膜的形成和運動(dòng)能力。而GefB蛋白(VPA1478)以存在GGDEF結構域為特征，可抑制副溶血弧菌的群集運動(dòng)能力。研究發(fā)現，刪除了GefB基因的副溶血弧菌產(chǎn)生了一系列的顯著(zhù)變化：c-di-GMP水平下降，生物膜形成減少，而游泳和群集運動(dòng)能力卻得到了增強。進(jìn)一步研究發(fā)現，GefB不僅參與了鞭毛相關(guān)基因的抑制，還激活了那些負責胞外多糖產(chǎn)生的基因。值得注意的是，GefB與其相鄰基因VPA1477共同構成一個(gè)名為vpa1477-gefB的轉錄單元，并且這個(gè)單元受到兩種群體感應調節劑AphA和OpaR的協(xié)同控制。具體來(lái)說(shuō)，在細菌細胞密度較低的情況下，AphA會(huì )促進(jìn)vpa1477-gefB的表達;而在高細胞密度條件下，OpaR則起到抑制作用。這一系列研究成果為我們深入理解副溶血弧菌內部復雜的c-di-GMP代謝網(wǎng)絡(luò )及其調控機制提供了寶貴的線(xiàn)索。
MGC系列微生物生長(cháng)曲線(xiàn)分析儀的應用
為了確定GefB基因缺失是否會(huì )對副溶血弧菌的生長(cháng)產(chǎn)生影響，研究人員使用了MGC-200微生物生長(cháng)曲線(xiàn)分析儀進(jìn)行實(shí)驗。
實(shí)驗中，副溶血弧菌RIMD2210633在心浸液肉湯中培養至OD600達到1.4，然后將該菌液作為種子菌液，以1：1000的比例接種到心浸液肉湯或者海生菌肉湯中，然后分裝到96孔細胞培養板，每孔含有200μL菌懸液，每個(gè)菌株設置12個(gè)生物學(xué)重復，37℃培養。MGC-200每30分鐘自動(dòng)檢測一次OD600值，以監測細菌的生長(cháng)情況。
研究發(fā)現無(wú)論在下心浸液肉湯(圖A)還是在海生菌肉湯(圖B)中，野生型(WT)和GefB基因缺失(ΔgefB)的副溶血弧菌的生長(cháng)率沒(méi)有明顯差異，這表明GefB基因的缺失不會(huì )直接影響副溶血弧菌的基本生長(cháng)特性。
結論
MGC系列微生物生長(cháng)曲線(xiàn)分析儀具有氣體環(huán)境監控、高通量培養、全自動(dòng)檢測以及實(shí)時(shí)顯示生長(cháng)曲線(xiàn)等的功能，整個(gè)過(guò)程無(wú)需人工頻繁取樣，也無(wú)需人員值守，大大降低了污染風(fēng)險，真正實(shí)現了人力的解放和研究效率的提升，將成為您科研路上的得力助手。
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