基因導入儀GP-3000

產(chǎn)品說(shuō)明

　　GP-3000基因導入儀由儀器主機、基因導入杯及專(zhuān)用連接線(xiàn)等組成。主要是利用電轉化來(lái)將 DNA 轉入感受態(tài)細胞、動(dòng)植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比，基因導入儀法具有高重復性，高效率、操作簡(jiǎn)易、可定量控制等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)，電轉沒(méi)有基因毒性，已經(jīng)成為不可缺少的分子生物學(xué)基本技術(shù)?！?/p>

工作原理

　　細胞電轉染（電轉），也叫細胞電穿孔 (electroporation)，是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導入細胞膜內部的重要方法?！?/p>

　　在瞬間強大電場(chǎng)的作用下，溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類(lèi)似電泳的方式進(jìn)入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細胞外部電流場(chǎng)產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受，細胞質(zhì)內分到的電壓可以忽略不計，細胞質(zhì)內部幾乎沒(méi)有電流，因此也決定了正常范圍內的電轉過(guò)程中細胞毒性很小。電場(chǎng)使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細胞膜后只能停止在細胞膜附近，隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處?！?/p>

　　由于電轉技術(shù)依靠的是物理方法，細胞表面的分子特性對電轉影響比較小。相比化學(xué)轉染方法和病毒載體轉染方法，電轉可以用在所有的細胞種類(lèi)上，而且容易定量控制?！?/p>

細胞電轉電場(chǎng)圖

1 細胞膜近似絕緣體，細胞附近電轉液中電流扭曲。

2 在串聯(lián)電路中電阻越大分到電壓越大，細胞兩端電壓基本都落在兩端細胞膜上。

3 只有一個(gè)細胞端面電轉有效。

4 細胞質(zhì)內分到電壓很小，DNA電轉進(jìn)入細胞膜后馬上停止，后續靠細胞本身機制慢速擴散。

5 細胞核兩端電壓及其微小，微小的電壓又落在核膜上，核內部完全沒(méi)有電壓，電轉沒(méi)有基因毒性。

產(chǎn)品特點(diǎn)

? 效率高 轉化時(shí)間短、轉化率高、重復性?xún)?yōu)異

? 智能儲存 可存儲實(shí)驗參數，方便用戶(hù)調取

? 控制精準 采用微處理器控制的脈沖放電

? 外形美觀(guān) 整機一體化設計，顯示直觀(guān)，操作簡(jiǎn)單

應用領(lǐng)域

?細菌、酵母及其他微生物的電轉化;

?哺乳動(dòng)物細胞的轉染、植物組織和原生質(zhì)體的轉染;

?細胞雜交、融合基因導入;

?導入標記基因起到標記、指示的作用;

?導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結構和功能進(jìn)行研究;

不同菌種的轉化率

實(shí)驗舉例

1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.

2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.